濕熱滅菌是利用蒸汽的高溫來破壞菌體蛋白質而達到徹底滅菌的方法。濕熱滅菌也屬于加熱滅菌，是常用的一種滅菌法。它不需要象干熱滅菌時那樣的高溫，在同一溫度下，濕熱的殺菌力比干熱的殺菌力大。這是因為濕熱滅菌時產生的熱蒸汽的穿透力強，在濕熱條件下，微生物吸收水分，蛋白質容易凝固變性。此外，當蒸汽與被滅菌物質接觸凝結成水時，又可釋放出熱量，加速溫度提高，從而又能增強滅菌效果。有些易變質物品，如食用菌培養基等必須采用這種方法進行滅菌。

　　根據加溫和處理方式不同，濕熱滅菌又分高壓蒸汽滅菌法、間歇滅菌法、常壓蒸汽滅菌法和熱浴滅菌法四種：

　　1、高壓蒸汽滅菌法

　　是將滅菌物置于密封容器內，利用加壓高溫蒸汽在較短時間內達到徹底滅菌的方法。又稱加壓蒸汽滅菌法。高壓滅菌的原理，是根據水的沸點可隨壓力增加而提高的原理，當水在密封緊閉的蒸鍋中，其蒸汽不能外溢，致使壓力不斷上升，從而使水的沸點不斷提高，鍋內溫度隨之增加。這樣殺滅細菌和芽孢所需的時間會縮短，所以是一種有效的滅菌方法。它適用于培養基、生理鹽水、玻璃器皿及用具等滅菌。當壓力在0.11兆帕（1.05千克/厘米2）時，鍋內溫度可達121.3℃，保持20~30分鐘即可殺滅所有細菌和芽孢。

　　2、常壓間歇滅菌法

　　是濕熱滅菌方法的一種。又稱達爾滅菌法。在沒有高壓滅菌設備的條件下，對一些不宜用l00℃以上溫度滅菌的物品，欲殺滅其中的細菌芽孢，可采用此法。具體操作方法是將培養基或其它滅菌物放置在蒸鍋內，經100℃的流動蒸汽滅菌30~120分鐘，殺死細菌的營養體，但不能殺死細菌的芽孢，然后將滅菌物取出，放置在28℃恒溫培養箱中培養24小時，誘發其中殘留的芽孢萌發成營養體（即菌絲體），然后再放入蒸鍋內常壓滅菌30分鐘，以殺死新萌發的營養體。如此反復連續常壓滅菌三次，即可殺死滅菌物的全部芽孢。此法由于不需加壓，采用普通家庭廚房用的蒸籠即可進行滅菌；缺點是操作麻煩，耗時長。

　　3、常壓蒸汽滅菌法

　　是將滅菌物品放在常壓滅菌鍋內，以自然壓力的蒸汽進行滅菌的方法，又稱流通蒸汽滅菌法。由于滅菌鍋的密封性能及所處的海拔高度不同，滅菌溫度一般在95℃~105℃之間，滅菌時間以鍋灶冒大氣開始計算，保持8~10小時以上。此法優點是：①容量大，一般一鍋可裝數百至千瓶（袋）；②鍋灶結構簡單，可自行制造；③材料易得，成本低；④培養基養分不受長時間高溫破壞，有助于培養料中的有機物分解。因此，已被食用菌栽培戶廣泛用于制作原種、栽培種的培養基滅菌和熟料栽培的培養料滅菌。

　　4、熱浴滅菌法

　　是將物品放在加熱的介質中，例如油類、甘油、液體石蠟或各種飽和鹽類溶液中，用其高溫進行滅菌，稱為熱浴滅菌法。熱浴滅菌是在不具備專門的高壓蒸汽滅菌設備或其它特殊情況下使用的一種簡易方法。它不能處理大型物品，并需專人守候火力來控制溫度，只可用于少量物品的滅菌。此法在一般煮鍋中即可進行，但必須有一支溫度計用以測定介質溫度。